细胞生物学考试题一、名词解释
1、细胞凋亡:细胞凋亡是多细胞有机体为机体发育,维护内环境稳定,由基因控制的细胞主动死亡的过程,是机体的一种基本生理机制,并贯穿于机体整个生命活动过程。
2、放大率:放大率就是放大倍数,是指被检物体经物镜、目镜放大后,人眼所看到的最终图象的大小与原物体大小的比值,是物镜和目镜放大倍数的乘积
3、显微结构:在普通光学显微镜中能够观察到的细胞结构,直径大于0.2微米,如细胞的大小及外部形态、染色体、线粒体、中心体、细胞核、核仁等,目前用于研究细胞显微结构的工具有普通光学显微镜、暗视野显微镜、相差显微镜、荧光显微镜等
4、分辨率:区分开两个质点间的最小距离
5、凋亡小体:细胞凋亡过程中产生的一种特殊的结构体,形成过程是核染色质断裂为大小不等的片段,与某些细胞器如线粒体一起聚集,为反折的细胞质膜所包围。从外观上看,细胞表面产生了许多泡状或芽状突起,以后,逐渐分隔,形成单个的凋亡小体。凋亡小体逐渐为邻近的细胞所吞噬并消化,不会影响周围的细胞,不会引起炎症反应。
6、细胞坏死:是细胞死亡的一种方式,通常指各种致病因子(物理的[辐射]、化学的[有毒物的侵袭]因素和生物因素[微生物感染]干扰和中断了细胞正常代谢活动而造成的细胞意外(非正常)死亡。在细胞坏死时,细胞膨胀,外形不规则;溶酶体膜破坏,水解酶外溢;细胞膜破坏,胞浆外溢,侵袭周围组织,引起炎症反应。
二、问答题
1、荧光激发滤色镜分哪几类?各自的激发波长是多少?
荧光激发滤色镜通常可分为紫外激发(U激发)、紫色激发(V激发)、蓝色激发(B激发)和绿色激发(G激发)等四种。U激发的激发波长是334nm, V激发的激发波长是365、405、435nm, B激发的激发波长是405、435及490nm附近的连续光谱,G激发的激发波长是546nm简述细
2、细胞凋亡的形态学特征有哪些?
细胞凋亡的发生过程,在形态学上可分为三个阶段。①凋亡的起始:细胞明显皱缩,染色质凝集、边缘化。这阶段的形态学变化表现为细胞表面的特化结构如微绒毛的消失,细胞间接触的消失,但细胞膜依然完整,未失去选择透性;细胞质中,线粒体大体完整,但核糖体逐渐从内质网上脱离,内质网囊腔膨胀,并逐渐与质膜融合;染色质固缩,形成新月形帽状结构等形态,沿着核膜分布。②凋亡小体的形成:首先,核染色质断裂为大小不等的片段,与某些细胞器如线粒体一起聚集,为反折的细胞质膜所包围。从外观上看,细胞表面产生了许多泡状或芽状突起。以后,逐渐分隔,形成单个的凋亡小体。③凋亡小体被吞噬。凋亡小体逐渐为邻近的细胞所吞噬并消化,不会影响周围的细胞,不会引起炎症反应。
3、根据标本染色的不同如何选择滤光片:
①染成蓝色或绿色的标本使用红色滤光片;②染成红色的标本使用绿色滤光片;③染成黄色或棕色的标本使用蓝色滤光片;④染成紫色的标本使用绿色滤光片;⑤染成蓝——紫色的标本使用黄色滤光片。
4、胞凋亡的生物学意义。
答案要点:1、清除无用的细胞;2、清除多余的细胞;3、清除发育不正常的细胞;4、清除已完成任务的、衰老的细胞;5、清除有害的、被感染的细胞。通过以上几方面的作用,保证器官的正常发生与构建、组织及细胞数目的相对平衡。
5、荧光显微镜使用的注意事项:
①长时间的激发光照射标本,会发生荧光衰减和消失现象,故应尽可能缩短照射(观察)时间。暂时不观察时,可用挡板遮盖激发光源。②在油浸观察时,应采用“无荧光油”,在使用U和V激发方式观察时更应注意。③标本所发的荧光较弱,观察时应尽可能在较暗的室内条件下进行。使用带有遮光罩的目镜时可将其拨出使用,以防杂光进人干扰。④荧光显微照相时,因曝光时间相对较长,可采用感光度较快的胶片。⑤避免直视紫外线光源,将紫外线防护板(黄色)装在载物台前以防紫外线损伤视网膜。⑥电源应装置稳压器,电压不稳会降低汞灯的使用寿命并影响镜检效果。
6、光学显微镜基本结构
光学显微镜在结构上分为光学系统和机械装置两个部分。光学系统主要包括目镜、物镜、聚光器、光阑及光源等部分。机械装置主要包括镜筒、镜柱、载物台、镜座、粗细调节螺旋等部分。
7、荧光显微镜在细胞生物学研究中有什么应用?
荧光显微镜是以紫外线为光源,照射被检物体发出荧光,在显微镜下观察形状及所在位置,图像清晰,色彩逼真。荧光显微镜可以观察细胞内天然物质经紫外线照射后发荧光的物质(如叶绿体中的叶绿素能发出血红色荧光);也可观察诱发荧光物质(如用丫啶橙染色后,细胞中RNA发红色荧光,DNA发绿色荧光),根据发光部位,可以定位研究某些物质在细胞内的变化情况。
8、比较放大率与分辨率的含义。
二者都是衡量显微镜性能的指标。通常放大率是指显微镜所成像的大小与样本实际大小的比率;而分辨率是指能分辨或区分出的被检物体细微结构的最小间隔,即两个点间的最小距离。放大率对分辨率有影响,但分辨率不仅仅取决于放大率。
9、试论述细胞凋亡的检测方法。
细胞凋亡的检测是基于凋亡细胞所形成的形态学和生物化学特征,特别是DNA的断裂。
①形态学观测:应用各种染色法可观察到凋亡细胞的各种形态学特征。②DNA电泳:细胞发生凋亡时,DNA发生特征性的核小体间的断裂,产生大小不同的片段,但都是180~200 bp的整数倍。③TUNEL测定法,即DNA断裂的原位末端标记法。④彗星电泳法:这是一种快速简便的凋亡检测法。⑤流式细胞分析:最常用来分析细胞凋亡的流式细胞技术。